Fgl2 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-420346
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- Fgl2 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico Fgl2, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: Fgl2 Anticuerpo (4H5): sc-100276
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Fgl2 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-420346 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
Fgl2 (proteína 2 similar al fibrinógeno) es una proteína inmunorreguladora asociada a la membrana y también secretada, expresada por células endoteliales y linajes mieloides, con funciones en la hemostasia y la señalización inflamatoria. En ratones, Fgl2 contribuye a la actividad protrombinasa que vincula la coagulación con las respuestas inmunitarias innata y adaptativa, influyendo en redes de citocinas y en el reclutamiento de leucocitos dentro de tejidos inflamados. Su expresión se modula aguas abajo de señales inflamatorias y se ha estudiado en contextos como modelos de hepatitis viral, rechazo de trasplantes y supresión inmunitaria asociada a tumores. Estas funciones hacen de Fgl2 una diana relevante para analizar la comunicación cruzada entre las vías de coagulación, la regulación de macrófagos y células T, y las respuestas al daño tisular.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO Fgl2 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Fgl2 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Fgl2 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Fgl2 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína Fgl2.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Fgl2 para la investigación de la señalización de Fgl2, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de Fgl2 críticos para la función de Fgl2
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Fgl2 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido Fgl2 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido Fgl2 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Fgl2. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR Fgl2 (m) y el plásmido HDR Fgl2 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Fgl2 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Fgl2 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.