Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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FGF-17 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-405951
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- FGF-17 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico FGF-17, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: FGF-17 Anticuerpo (B-4): sc-376056
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
FGF-17 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-405951 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
FGF17 codifica el factor de crecimiento de fibroblastos 17 (FGF-17), un ligando secretado con afinidad por la heparina que señaliza principalmente a través de las tirosina quinasas receptoras de la familia FGFR para regular la proliferación celular, la supervivencia y la especificación de linaje. La actividad de FGF-17 activa cascadas canónicas de RTK, incluidas RAS–MAPK/ERK y PI3K–AKT, influyendo en el patrón tisular y en programas mitogénicos dependientes del contexto. En biología humana, la desregulación de la señalización FGF/FGFR se asocia con frecuencia a trayectorias del desarrollo alteradas y a la activación de vías oncogénicas, lo que convierte a FGF17 en un nodo útil para estudiar la dinámica de señalización impulsada por factores de crecimiento. Investigar FGF17 respalda estudios mecanísticos sobre comunicación paracrina/autocrina, disponibilidad del ligando modulada por la matriz extracelular y la interacción (cross-talk) entre vías que pueden moldear fenotipos relevantes para la enfermedad.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO FGF-17 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen FGF17 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del FGF17 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de FGF17 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína FGF-17.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en FGF17 para la investigación de la señalización de FGF-17, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de FGF17 críticos para la función de FGF-17
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de FGF17 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido FGF-17 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido FGF-17 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus FGF17. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR FGF-17 (h) y el plásmido HDR FGF-17 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología FGF17 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana FGF17 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.