FEZF2 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-406571

Übersicht

FEZF2 (FEZ family zinc finger 2) kodiert einen Transkriptionsfaktor mit C2H2‑Typ-Zinkfinger-Domänen, der als zentraler Regulator der Vorderhirnentwicklung und der Spezifikation neuronaler Subtypen fungiert. In der menschlichen Neuroentwicklung beeinflusst FEZF2 die Kortexentwicklung (Korticogenese), indem es das Schicksal kortikothalamischer Projektionsneurone steuert und Transkriptionsprogramme koordiniert, die mit Axonführung, neuronaler Migration und regionaler Musterbildung verknüpft sind. Über seine Rolle in abstammungsliniendefinierenden Genregulationsnetzwerken trägt FEZF2 zur Etablierung kortikaler Schaltkreise und synaptischer Konnektivität bei. Eine Fehlregulation oder genetische Variation in FEZF2-assoziierten Regulationswegen wurde im Zusammenhang mit neurodevelopmentalen und neuropsychiatrischen Phänotypen untersucht, was FEZF2 für mechanistische Studien der Gehirnentwicklung und neuronalen Identität relevant macht.

Das FEZF2 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des FEZF2-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des FEZF2-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von FEZF2 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die FEZF2-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von FEZF2-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der FEZF2-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf FEZF2-Exone abzielen, die für die FEZF2-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere FEZF2-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom FEZF2 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom FEZF2 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des FEZF2-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das FEZF2 HDR-Plasmid (h) und FEZF2 HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von FEZF2-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten FEZF2-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.