Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Fes Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-403246
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- Fes El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico Fes, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: Fes Anticuerpo (D-9): sc-377179
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Fes Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-403246 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
FES codifica Fes, una tirosina quinasa citoplasmática no receptora expresada principalmente en linajes hematopoyéticos y mieloides, donde acopla las señales procedentes de receptores a cascadas de fosforilación aguas abajo. Fes participa en redes de señalización que regulan la diferenciación, la remodelación del citoesqueleto, la adhesión celular y funciones de la inmunidad innata, integrando señales de vías de citocinas y factores de crecimiento. A través de sus dominios SH2 y quinasa, Fes modula sustratos implicados en la dinámica de actina y en programas transcripcionales que configuran el desarrollo de los leucocitos y las respuestas inflamatorias. La señalización y la expresión desreguladas de FES se han investigado en la biología de las neoplasias hematológicas y en contextos de activación mieloide aberrante, lo que lo convierte en un nodo relevante para diseccionar circuitos de señalización impulsados por quinasas.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO Fes (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen FES en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del FES junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de FES tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína Fes.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en FES para la investigación de la señalización de Fes, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de FES críticos para la función de Fes
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de FES para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido Fes CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido Fes CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus FES. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR Fes (h) y el plásmido HDR Fes (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología FES para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana FES definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.