FCM Fixation buffer (10X)

El tampón de fijación para citometría de flujo (FCM) (10X) es un reactivo crucial empleado en la investigación inmunológica y de biología celular, especialmente en aplicaciones de citometría de flujo. Este tampón especializado está meticulosamente formulado para preservar las estructuras celulares y los epítopos antigénicos, permitiendo así un análisis preciso y fiable de las poblaciones celulares. La composición del tampón de fijación FCM (10X) suele incluir paraformaldehído (PFA) como agente fijador primario, junto con otros componentes como tampón fosfato sódico y sacarosa. El PFA reacciona con las proteínas celulares, formando enlaces cruzados que inmovilizan las estructuras celulares y evitan la degradación o alteración de los epítopos antigénicos. El tampón fosfato sódico mantiene la estabilidad del pH de la solución, asegurando unas condiciones óptimas de fijación, mientras que la sacarosa ayuda a mantener la osmolaridad celular y minimizar la contracción o hinchazón celular durante la fijación. En los experimentos de citometría de flujo, el tampón de fijación FCM (10X) se utiliza para detener los procesos celulares y preservar la morfología celular y los patrones de expresión de proteínas. Las células se tratan primero con el tampón, que penetra rápidamente en la membrana celular y reticula las proteínas intracelulares al entrar en contacto con ellas. Este paso de fijación inmoviliza eficazmente los componentes celulares, incluidos los antígenos, dentro de la célula, preservando su distribución espacial y abundancia relativa. Los investigadores emplean FCM Fixation Buffer (10X) en diversas aplicaciones de citometría de flujo, incluyendo inmunofenotipado, análisis del ciclo celular y tinción intracelular. Tras la fijación, las células pueden permeabilizarse para permitir el acceso de anticuerpos o colorantes fluorescentes a objetivos intracelulares, lo que permite el análisis multiparamétrico de la expresión de proteínas y funciones celulares. La optimización de las condiciones de fijación, incluida la concentración de tampón, el tiempo de fijación y la temperatura, es esencial para obtener resultados óptimos en los experimentos de citometría de flujo. Una fijación inadecuada puede provocar la aglutinación de células, la pérdida de antigenicidad o la unión inespecífica de anticuerpos, lo que afecta negativamente a la calidad y la interpretación de los datos.