Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
FBL8 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406696
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- FBL8 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico FBL8, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: FBL8 Anticuerpo (D-1): sc-390582
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
FBL8 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-406696 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
FBXL8 (FBL8) codifica una proteína con dominio F-box que se predice que funciona como componente de reconocimiento de sustratos de los complejos ligasa E3 de ubiquitina SCF (SKP1–CUL1–F-box), apoyando el recambio de proteínas dependiente de ubiquitina. Mediante la ubiquitinación selectiva de proteínas diana, FBXL8 está en posición de influir en programas de proteostasis que moldean la progresión del ciclo celular, la transducción de señales y las respuestas al estrés. La perturbación de la actividad de las ligasas de ubiquitina mediadas por F-box puede alterar el control de los puntos de control y la dinámica de vías vinculadas a la transformación oncogénica y a otros trastornos proliferativos. Por lo tanto, FBXL8 sirve como un nodo útil para investigar cómo la degradación dirigida se integra con la homeostasis celular y con redes de señalización asociadas a enfermedades.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO FBL8 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen FBXL8 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del FBXL8 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de FBXL8 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína FBL8.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en FBXL8 para la investigación de la señalización de FBL8, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de FBXL8 críticos para la función de FBL8
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de FBXL8 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido FBL8 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido FBL8 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus FBXL8. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR FBL8 (h) y el plásmido HDR FBL8 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología FBXL8 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana FBXL8 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.