Fatty Acid Synthase Lentiviral Activation Particles (h): sc-400440-LAC

Das humane Gen **FASN** kodiert die Fettsäuresynthase, einen multifunktionalen zytosolischen Enzymkomplex, der die **de-novo-Lipogenese** katalysiert, indem er Acetyl‑CoA und Malonyl‑CoA in langkettige gesättigte Fettsäuren wie Palmitat umwandelt. Diese Aktivität ist mit dem zentralen Kohlenstoffstoffwechsel, der NADPH‑abhängigen reduktiven Biosynthese und dem Lipid‑Remodeling verknüpft und unterstützt so Membranbiogenese, Protein‑Acylierung und lipidbasierte Signalgebung. Die FASN‑Funktion greift in Nährstoffsensorik‑ und Wachstumswege ein, einschließlich der PI3K–AKT–mTOR‑Signalübertragung, und wird durch transkriptionelle Programme moduliert, die von SREBP und verwandten lipogenen Regulatoren gesteuert werden. Eine fehlregulierte FASN‑Expression und ein erhöhter lipogener Flux sind häufig mit metabolischen Erkrankungen und der krebsassoziierten metabolischen Umprogrammierung verbunden, wodurch FASN einen zentralen Knotenpunkt für die Untersuchung des Lipidstoffwechsels und von Zellzustandsübergängen darstellt.

Fatty Acid Synthase Lentivirale Aktivierungspartikel (h) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente FASN-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

Fatty Acid Synthase Lentivirale Aktivierungspartikel (h) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der FASN-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen Fatty Acid Synthase-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen FASN-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.