Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
FANCF Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406909
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- FANCF O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico FANCF, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:FANCF Anticorpo (D-2): sc-271952
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
FANCF Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-406909 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
FANCF codifica um componente central da via de reparo de DNA da anemia de Fanconi (FA), que ajuda a montar e estabilizar o complexo central de FA responsável pela monoubiquitinação de FANCD2 e FANCI. Essa modificação coordena o reparo de ligações cruzadas intercadeias do DNA e promove a proteção da forquilha de replicação por meio de crosstalk com a recombinação homóloga e a sinalização de checkpoints. A função de FANCF sustenta a estabilidade do genoma durante a fase S, e a perda ou desregulação da atividade da via de FA está associada à instabilidade cromossômica e a respostas alteradas ao estresse replicativo. Defeitos genéticos em genes de FA, incluindo FANCF, estão associados à biologia da anemia de Fanconi e são amplamente estudados no contexto de mecanismos de tolerância a danos no DNA.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO FANCF (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene FANCF em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do FANCF, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do FANCF na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína FANCF.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de FANCF para a investigação da sinalização de FANCF, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) FANCF críticos para a função FANCF
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos FANCF para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo FANCF Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo FANCF Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus FANCF. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo FANCF Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR FANCF (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia FANCF para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo FANCF definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.