FAM83B Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-415158

Descripción general

FAM83B (familia con similitud de secuencia 83, miembro B) es un adaptador citoplasmático de señalización implicado en la amplificación de las salidas de los receptores tirosina cinasa y de la actividad de la vía MAPK/ERK aguas abajo, lo que respalda programas de proliferación y supervivencia en células epiteliales. Se ha vinculado con la modulación de la dinámica de señalización EGFR/RAS y con la comunicación cruzada con procesos asociados a PI3K, influyendo en respuestas transcripcionales y en la progresión del ciclo celular. Se ha descrito una expresión desregulada de FAM83B en múltiples contextos tumorales y se estudia como un contribuyente a la robustez de la señalización oncogénica, a fenotipos de tolerancia a terapias y a una dependencia alterada de factores de crecimiento. Estas características hacen de FAM83B un nodo útil para desentrañar la arquitectura de las vías, el control por retroalimentación y las relaciones genotipo–fenotipo en modelos de biología del cáncer.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO FAM83B (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen FAM83B en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del FAM83B junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de FAM83B tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína FAM83B.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en FAM83B para la investigación de la señalización de FAM83B, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de FAM83B críticos para la función de FAM83B
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de FAM83B para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido FAM83B CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido FAM83B CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus FAM83B. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR FAM83B (h) y el plásmido HDR FAM83B (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología FAM83B para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana FAM83B definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.