Plásmido Doble Nickase (h) FAM50B: sc-411902-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)FAM50B consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa FAM50B (h) y el plásmido de doble nickasa FAM50B (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a FAM50B. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) FAM50B | sc-411902-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) FAM50B | sc-411902-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
FAM50B codifica una proteína nuclear conservada implicada en el procesamiento de ARN y la regulación de la expresión génica, con funciones propuestas en eventos asociados al espliceosoma y en la maduración de transcritos. El gen se encuentra en una región sometida a impronta genómica y se estudia con frecuencia en el contexto de la regulación específica de alelo y el control epigenético de programas transcripcionales durante el desarrollo. Se ha informado de una expresión alterada de FAM50B en múltiples conjuntos de datos transcriptómicos asociados a enfermedades, lo que respalda su uso como regulador candidato en vías que afectan el estado celular y la diferenciación. Estas características convierten a FAM50B en un objetivo útil para investigar el metabolismo nuclear del ARN, las redes reguladoras vinculadas a la impronta y los mecanismos que conectan el genotipo con el fenotipo en células humanas.
FAM50B El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus FAM50B en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de FAM50B. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de FAM50B. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con FAM50B alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.