Plásmido Doble Nickase (h) FAM46A: sc-410014-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)FAM46A consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa FAM46A (h) y el plásmido de doble nickasa FAM46A (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a FAM46A. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) FAM46A | sc-410014-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) FAM46A | sc-410014-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
FAM46A (familia con similitud de secuencia 46, miembro A, también conocido como TENT5A) codifica una poli(A) polimerasa no canónica implicada en el alargamiento citoplasmático de la cola poli(A) del ARNm, lo que influye en la estabilidad de los transcritos y en la eficiencia de traducción. Esta proteína se asocia con programas de regulación génica posranscripcional que modelan transiciones de estado celular, incluidos cambios ligados a la diferenciación en la expresión de genes secretorios y de matriz extracelular. La alteración de FAM46A se ha relacionado con un metabolismo del ARN desregulado y una proteostasis modificada, y se han descrito cambios genéticos o de expresión en contextos de enfermedades hematológicas como el mieloma múltiple. Por ello, FAM46A se estudia con frecuencia por su contribución a las vías de procesamiento del ARN y sus efectos posteriores sobre el fenotipo celular.
FAM46A El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus FAM46A en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de FAM46A. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de FAM46A. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con FAM46A alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.