FAM208A Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-405884

Descripción general

FAM208A codifica una proteína nuclear que participa en procesos asociados a la cromatina que influyen en la regulación transcripcional y el mantenimiento del genoma. Se ha vinculado a vías de respuesta al daño del ADN y al control epigenético mediante interacciones con complejos nucleares multiproteicos, favoreciendo la progresión adecuada del ciclo celular y la adaptación al estrés. La alteración de la regulación de la organización de la cromatina y de la fidelidad de la reparación en la que interviene FAM208A puede contribuir a los fenotipos de inestabilidad genómica observados en el cáncer y otros trastornos proliferativos. Su localización predominantemente nuclear la convierte en un objetivo útil para desentrañar mecanismos que acoplan el estado de la cromatina con la expresión génica y los resultados de la reparación del ADN en células humanas.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO FAM208A (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen FAM208A en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del FAM208A junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de FAM208A tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína FAM208A.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en FAM208A para la investigación de la señalización de FAM208A, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de FAM208A críticos para la función de FAM208A
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de FAM208A para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido FAM208A CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido FAM208A CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus FAM208A. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR FAM208A (h) y el plásmido HDR FAM208A (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología FAM208A para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana FAM208A definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.