FAM188B Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-413571

Descripción general

FAM188B codifica una proteína humana poco caracterizada, implicada en la regulación de la homeostasis proteica y de la señalización mediante presuntas asociaciones con la degradación dependiente de ubiquitina y con redes de proteostasis. La evidencia emergente vincula a FAM188B con la proliferación celular y con respuestas adaptativas al estrés, lo que sugiere relevancia para vías que coordinan la progresión del ciclo celular, la señalización de supervivencia y la adaptación a condiciones de estrés proteotóxico. Se han reportado patrones de expresión alterados en múltiples tipos de tumores, lo que respalda la investigación de FAM188B como modulador de fenotipos oncogénicos y de vulnerabilidades dependientes del contexto. A pesar de la limitada definición mecanística, FAM188B es una diana útil para dilucidar cómo la regulación del proteoma se interconecta con el control del crecimiento y la aptitud celular.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO FAM188B (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen FAM188B en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del FAM188B junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de FAM188B tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína FAM188B.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en FAM188B para la investigación de la señalización de FAM188B, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de FAM188B críticos para la función de FAM188B
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de FAM188B para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido FAM188B CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido FAM188B CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus FAM188B. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR FAM188B (h) y el plásmido HDR FAM188B (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología FAM188B para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana FAM188B definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.