Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
Factor IX Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-402469
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- Factor IX El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico Factor IX, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: Factor IX Anticuerpo (B-3): sc-377187
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Factor IX Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-402469 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
El gen humano **F9** codifica el **factor IX de la coagulación**, un cimógeno de **serina proteasa dependiente de vitamina K** que se activa a **factor IXa** y actúa en la **vía intrínseca** de la coagulación sanguínea. En complejo con **factor VIIIa** sobre superficies fosfolipídicas, el factor IXa cataliza la activación del **factor X**, promoviendo la generación de **trombina** y la formación del coágulo de **fibrina**. La actividad de F9 se modula mediante la **γ-carboxilación** postraduccional y la unión a membrana **dependiente de calcio**, lo que lo vincula al procesamiento proteico hepático y a las cascadas proteolíticas extracelulares. La alteración o deficiencia funcional de F9 se asocia con fenotipos hemorrágicos hereditarios y se estudia de forma rutinaria para comprender la regulación de la red de coagulación y las interacciones entre proteasas y cofactores.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO Factor IX (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen F9 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del F9 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de F9 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína Factor IX.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en F9 para la investigación de la señalización de Factor IX, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de F9 críticos para la función de Factor IX
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de F9 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido Factor IX CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido Factor IX CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus F9. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR Factor IX (h) y el plásmido HDR Factor IX (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología F9 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana F9 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.