F-Spondin Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-404101

Descripción general

SPON1 codifica F-spondina, una glucoproteína secretada asociada a la matriz extracelular (MEC), enriquecida en el sistema nervioso, que modula las interacciones célula–matriz, el crecimiento de neuritas y la guía axonal durante el desarrollo y la remodelación tisular. La F-spondina puede influir en la adhesión y la migración al activar señales dependientes de integrinas y proteoglucanos y al moldear la organización de la matriz extracelular. Se ha relacionado con la regulación de la conectividad sináptica y la plasticidad neuronal, y se ha informado de una expresión alterada de SPON1 en contextos de neurodegeneración y de remodelación asociada a lesiones. Como señal de la MEC, la F-spondina también se estudia por sus funciones en procesos vasculares y fibróticos, donde la señalización de la matriz y la motilidad celular son centrales.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO F-Spondin (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen SPON1 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del SPON1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de SPON1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína F-Spondin.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en SPON1 para la investigación de la señalización de F-Spondin, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de SPON1 críticos para la función de F-Spondin
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de SPON1 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido F-Spondin CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido F-Spondin CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus SPON1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR F-Spondin (h) y el plásmido HDR F-Spondin (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología SPON1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana SPON1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.