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EY-cadherin双切口酶质粒(h) | sc-401988-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
EY-cadherin双切口酶质粒(h2) | sc-401988-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CDH18 编码人类 EY-钙黏蛋白(EY-cadherin),这是一种属于钙黏蛋白超家族的钙依赖性细胞-细胞黏附受体,参与组织结构维持及接触依赖的信号传导。通过同源性黏附以及与连环蛋白(catenins)和肌动蛋白细胞骨架的连接,EY-钙黏蛋白影响黏着连接的组织、细胞极性以及细胞骨架重塑。钙黏蛋白表达模式的改变可能扰乱上皮与神经相关的黏附程序,从而影响细胞迁移与分化状态。多种疾病背景中,钙黏蛋白介导的黏附失衡与侵袭性表型及异常的发育信号传导有关,因此 CDH18 可作为研究连接结构生物学机制的靶点。
EY-cadherin 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 CDH18 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对CDH18内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏CDH18的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了CDH18基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。