非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
EY-cadherin CRISPR/Cas9 KO质粒 (h): sc-401988
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- EY-cadherin CRISPR/Cas9 基因敲除（KO）质粒（h） 是一组质粒混合物，每种质粒均编码 Cas9 核酸酶及针对特定靶点的 20 核苷酸引导 RNA（gRNA），其设计基于 GeCKO v2 文库中的序列，旨在实现最高的基因敲除效率
- gRNA序列引导Cas9在EY-cadherin基因组位点诱导位点特异性双链断裂（DSBs），从而通过非同源末端连接（NHEJ）实现基因敲除
- 嘌呤霉素抗性基因和 RFP 基因两侧有 LoxP 位点，因此在建立稳定的基因敲除细胞系后，可以通过 Cre 重组酶（Cre 向量：sc-418923）去除选择标记。
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：EY-cadherin: sc-81791，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
EY-cadherin CRISPR/Cas9 KO质粒 (h) | sc-401988 | 20 µg | $397.00 |
概述
CDH18 编码人类 EY-钙黏蛋白（EY-cadherin），属于经典钙黏蛋白家族成员，可介导 Ca²⁺ 依赖的细胞—细胞黏附，并通过连环蛋白（catenin）复合物将黏着连接（adherens junctions）与肌动蛋白细胞骨架耦联，从而维持组织结构。CDH18 通过调控细胞间黏聚性、细胞极性以及接触依赖性信号传导，能够影响与上皮和神经组织构建相关的过程，包括细胞迁移与边界形成。在疾病相关模型中，钙黏蛋白表达改变与连接结构完整性受损常与分化失调和侵袭性行为相关，因此 CDH18 是研究由黏附驱动表型的一个有用关键节点。针对 CDH18 的表达模式以及遗传或表观遗传扰动，已有研究在多种细胞身份与连通性受破坏的情境中开展，包括癌症与神经发育障碍。
EY-cadherin CRISPR/Cas9 KO质粒（h）是一组旨在针对性地破坏human细胞系中CDH18基因的质粒池。每条质粒均共表达一种独特的单引导RNA（sgRNA），该sgRNA针对CDH18基因内的特定位点，并携带来自化脓性链球菌的Cas9核酸酶。这些质粒还编码GFP，可通过荧光显微镜或流式细胞术对成功转染的细胞进行荧光标记和富集。
多引导设计提高了在Cas9介导的双链断裂形成后，产生破坏CDH18开放阅读框的插入或缺失（indels）的概率。CRISPR/Cas9系统引入的DNA断裂通过内源性非同源末端连接（NHEJ）途径修复，通常会导致移码突变，从而使EY-cadherin蛋白表达失活。
该CRISPR敲除系统能够高效构建CDH18缺失的细胞模型，用于EY-cadherin信号传导研究、功能基因组学研究、癌症生物学研究以及人类细胞系中治疗反应的评估。
主要特点
- 针对对 EY-cadherin 功能至关重要的 CDH18 外显子的 sgRNA
通过单质粒共表达 SpCas9 和 sgRNA 以简化递送过程
GFP 报告基因用于识别转染细胞
针对多个 CDH18 基因组位点的质粒池以提高敲除效率
兼容转染递送
设计变体
CRISPRs +/- HDR
- 由 EY-cadherin CRISPR/Cas9 KO 质粒 (h) 和 EY-cadherin CRISPR/Cas9 KO 质粒 (h2) 编码的 gRNA 分别靶向 CDH18 基因座内的不同位点。可能提供其中一种或两种靶向设计。具体供应情况请参见相关产品。
由 EY-cadherin HDR 质粒（h）编码的 HDR 供体构建体以及 EY-cadherin HDR质粒（h2）编码的HDR供体构建体包含一个嘌呤霉素抗性盒和一个RFP报告基因，其两侧由CDH18同源臂包围，以支持在与CRISPR/Cas9敲除设计对应的特定CDH18靶位点进行同源导向修复。HDR供体的供应情况可能有所不同。请查看“相关产品”了解供应情况。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。