Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Evi-1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-404112
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- Evi-1 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico Evi-1, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: Evi-1 Anticuerpo (H-8): sc-515456
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Evi-1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-404112 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
MECOM codifica el factor de transcripción Evi-1, una proteína de unión al ADN con dedos de zinc que regula programas de expresión génica que controlan el mantenimiento de las células madre y progenitoras hematopoyéticas, el compromiso de linaje y la diferenciación celular. Evi-1 participa en redes transcripcionales y epigenéticas que convergen con la señalización TGF-β/SMAD, las vías PI3K–AKT y la remodelación de la cromatina para modular la proliferación y la supervivencia. La actividad desregulada de MECOM/Evi-1 se asocia con frecuencia a neoplasias hematológicas, donde el control transcripcional alterado contribuye a una autorrenovación aberrante y a una diferenciación defectuosa. Además del desarrollo sanguíneo, MECOM se ha implicado en procesos del desarrollo y en circuitos transcripcionales oncogénicos relevantes para la transformación y los fenotipos metastásicos en múltiples contextos tisulares.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO Evi-1 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen MECOM en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del MECOM junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de MECOM tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína Evi-1.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en MECOM para la investigación de la señalización de Evi-1, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de MECOM críticos para la función de Evi-1
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de MECOM para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido Evi-1 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido Evi-1 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus MECOM. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR Evi-1 (h) y el plásmido HDR Evi-1 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología MECOM para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana MECOM definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.