Plásmido Doble Nickase (h) Estrogen Receptor beta: sc-400213-NIC

El gen humano **ESR2** codifica el receptor de estrógenos beta (**ERβ**), un receptor nuclear activado por ligando que regula programas transcripcionales que controlan la proliferación celular, la diferenciación, la apoptosis y la modulación inmunitaria en respuesta a los estrógenos y ligandos relacionados. ERβ actúa mediante elementos de respuesta a estrógenos clásicos y a través de interacciones “tethered” (de anclaje) con factores de transcripción, integrando señales de las vías **MAPK/PI3K-AKT** y del remodelado de la cromatina para configurar una expresión génica dependiente del contexto. En muchos tejidos, ERβ contrarresta la transcripción impulsada por **ERα** y contribuye a la homeostasis epitelial, la función mitocondrial y la señalización inflamatoria. La actividad desregulada de **ESR2** o una expresión alterada de **ERβ** se ha asociado con cánceres sensibles a hormonas, fenotipos reproductivos y metabólicos, y procesos neuroinflamatorios, lo que lo convierte en una diana clave para estudios mecanísticos de la señalización estrogénica.

Estrogen Receptor beta El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus ESR2 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de ESR2. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de ESR2. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.

Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con ESR2 alterado.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.