Nicht CRISPR-Daten: Das Bild veranschaulicht die Qualität von Antikörpern zur Visualisierung von CRISPR-Experimentergebnissen.
Nicht CRISPR-Daten: Das Bild veranschaulicht die Qualität von Antikörpern zur Visualisierung von CRISPR-Experimentergebnissen.
Estrogen Receptor beta CRISPR Activation Plasmid (r): sc-437278-ACT
- Zielspezies: rat
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Estrogen Receptor beta CRISPR Activation Plasmid (r) ist ein Transkriptionsaktivierungs System (SAM) welches für die gezielte Verstärkung der Genexpression bestimmt ist
- Estrogen Receptor beta CRISPR Aktivierungsplasmide (r) bestehen aus 3 Plasmiden im Massenverhältnis 1:1:1: ein Plasmid kodiert für die deaktivierte Cas9 (dCas9) Nuklease (D10A und N863A) fusioniert an die Transaktivierungsdomaine VP64 sowie ein Gen für die Blasticidin Resistenz; ein zweites Plasmid kodierend für das MS2-p65-HSF1 Fusionsprotein sowie ein Gen für die Hygromycin Resistenz; ein drittes Plasmid kodierd für die Ziel-spezifische 20 nt guide RNA fusioniert an zwei MS2 RNA Aptamere sowie ein Gen für die Puromycin Resistenz.
- Der entstehende SAM-Komplex (Mediator-Komplex zur synergistischen Gen-Aktivierung) bindet eine sequenzspezifische Region 200-250 nt upstream (in 5'-Richtung) des Transkriptionsstartsignals und rekrutiert dort ständig Transkriptionsfaktoren für eine verstärkte Gen-Aktivierung und Gen-Expression.
- Die vom Estrogen Receptor beta CRISPR-Aktivierungsplasmid (r) und vom Estrogen Receptor beta CRISPR-Aktivierungsplasmid (r2) kodierten gRNAs zielen auf unterschiedliche regulatorische Regionen stromaufwärts der -Transkriptionsstartstelle ab. Eines oder beide Designs sind möglicherweise verfügbar
- Nach der Transfektion kann die Effizienz des Gen-Knockouts per Western Blot oder histologisch mit folgendem Antikörper überprüft werden: Estrogen Receptor beta: sc-390243
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
Estrogen Receptor beta CRISPR Activation Plasmid (r) | sc-437278-ACT | 20 µg | $397.00 | |||
Estrogen Receptor beta CRISPR Activation Plasmid (r2) | sc-437278-ACT-2 | 20 µg | $397.00 |
Östrogenrezeptor beta (ERβ), kodiert durch das Ratten-Gen *Esr2*, ist ein ligandenaktivierter nukleärer Rezeptor, der als Transkriptionsfaktor fungiert und östrogenresponsive Gen-Netzwerke reguliert. Nach Hormonbindung moduliert ERβ das Chromatin und rekrutiert Koregulatoren, um Programme zu steuern, die an Zellproliferation, Differenzierung, Apoptose und metabolischer Homöostase beteiligt sind. Die ERβ-Signalgebung überschneidet sich mit PI3K/AKT-, MAPK/ERK- und entzündlichen Signalwegen und prägt gewebespezifische Antworten in Fortpflanzungsorganen, Gehirn, Knochen und im Herz-Kreislauf-System. Eine fehlregulierte ERβ-Aktivität und ein verändertes Gleichgewicht der Östrogensignalgebung wurden mit der Biologie hormonabhängiger Tumoren, Neuroinflammation und metabolischer Dysfunktion in Verbindung gebracht, was *Esr2* zu einem nützlichen Ziel für mechanistische Studien in Rattenmodellen macht.
Estrogen Receptor beta Das CRISPR-Aktivierungsplasmid (r) bietet einen gezielten, nicht-destruktiven Ansatz zur Hochregulierung der endogenen -Expression, ohne die zugrunde liegende DNA-Sequenz zu verändern.
Estrogen Receptor beta Das CRISPR-Aktivierungsplasmid (r) ist ein aus drei Plasmiden bestehendes synergistisches Aktivierungsmediator-System (SAM), das für eine hocheffiziente, ortsspezifische transkriptionelle Hochregulation des -Lokus in menschlichen Zelllinien entwickelt wurde. Das System basiert auf einem katalytisch inaktiven Cas9 (dCas9), das zwei inaktivierende Mutationen (D10A und N863A) trägt, welche die Nukleaseaktivität eliminieren, während die DNA-Bindung erhalten bleibt. Dieses dCas9 ist mit VP64, einem potenten Transkriptionsaktivator, fusioniert und wird zusammen mit einem Blasticidin-Resistenzgen zur Selektion koexprimiert. Das zweite Plasmid kodiert das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein, einen sekundären Aktivatorkomplex, der zusammen mit dCas9-VP64 wirkt, sowie ein Hygromycin-Resistenzgen. Das dritte Plasmid kodiert für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA, die an zwei MS2-RNA-Aptamere fusioniert ist, welche den MS2-p65-HSF1-Komplex an die Aktivierungsstelle rekrutieren, begleitet von einem Puromycin-Resistenzgen. Die drei Plasmide werden im Massenverhältnis 1:1:1 verabreicht, um eine ausgewogene Expression aller Systemkomponenten zu gewährleisten.
Nach der Assemblierung am Zielort bindet der SAM-Komplex etwa 200 bp stromaufwärts der -Transkriptionsstartstelle, wo VP64, p65 und HSF1 gemeinsam die Transkriptionsmaschinerie rekrutieren und die Hochregulation der endogenen Estrogen Receptor beta-Expression vorantreiben. Im Gegensatz zu nukleaseaktivem Cas9 verursacht dCas9 keine Doppelstrangbrüche und verändert die genomische Sequenz nicht, wodurch der native -Locus erhalten bleibt und die Untersuchung von Estrogen Receptor beta-abhängigen Transkriptionsreaktionen am endogenen Locus ermöglicht wird. Dies macht es zu einem wertvollen Werkzeug für Funktionsstudien, die Identifizierung von Zielgenen und die Modellierung der Wiederherstellung des Estrogen Receptor beta-Signalwegs in Tumorzellen mit stillgelegtem oder reduziertem -Ausdruck.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.