ERRγ CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-416300

Übersicht

ESRRG kodiert den estrogen-related receptor gamma (ERRγ), einen verwaisten nukleären Rezeptor, der als ligandenunabhängiger Transkriptionsfaktor fungiert und die mitochondriale Biogenese, die oxidative Phosphorylierung sowie die zelluläre Energiehomöostase reguliert. ERRγ kooperiert mit PGC‑1‑Koaktivatoren, um Genprogramme zu steuern, die an der Fettsäureoxidation, der Aktivität des TCA-Zyklus und dem Aufbau der Atmungskette beteiligt sind, und verbindet so die transkriptionelle Kontrolle mit metabolischer Anpassung. Zudem ist ERRγ an gewebespezifischen Differenzierungsprogrammen beteiligt, unter anderem im kardialen und neuronalen Kontext, und moduliert endokrine sowie stressresponsive Signalnetzwerke. Eine dysregulierte ESRRG/ERRγ-Aktivität wurde mit metabolischem Remodeling und veränderten bioenergetischen Zuständen in mehreren krankheitsrelevanten Modellen in Verbindung gebracht, was seine Nutzung als mechanistischer Knotenpunkt in systembiologischen Studien unterstützt.

Das ERRγ CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des ESRRG-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des ESRRG-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von ESRRG nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die ERRγ-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von ESRRG-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der ERRγ-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf ESRRG-Exone abzielen, die für die ERRγ-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere ESRRG-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom ERRγ CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom ERRγ CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des ESRRG-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das ERRγ HDR-Plasmid (h) und ERRγ HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von ESRRG-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten ESRRG-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.