ERRβ Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-424021
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- ERRβ O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico ERRβ, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
ERRβ Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-424021 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
O receptor beta relacionado ao estrogênio (ERRβ), codificado no camundongo por **Esrrb**, é um receptor nuclear órfão que atua como fator de transcrição, coordenando programas gênicos envolvidos no metabolismo energético, na função mitocondrial e em decisões de destino celular. Em células pluripotentes, **Esrrb** contribui para a manutenção da autorrenovação e se integra a redes transcricionais centrais que regulam a diferenciação e o comprometimento de linhagem. A atividade de ERRβ está ligada à sinalização de receptores de hormônios esteroides e a um controle transcricional mais amplo de vias oxidativas e de desenvolvimento. A desregulação da transcrição dependente de **Esrrb** tem sido associada a desfechos de desenvolvimento alterados e a mudanças dependentes do contexto na proliferação celular e no estado metabólico, sustentando seu uso como um nó mecanístico em modelos relevantes para doenças.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO ERRβ (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Esrrb em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Esrrb, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Esrrb na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína ERRβ.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Esrrb para a investigação da sinalização de ERRβ, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Esrrb críticos para a função ERRβ
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Esrrb para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo ERRβ Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo ERRβ Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Esrrb. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo ERRβ Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR ERRβ (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Esrrb para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Esrrb definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.