Plásmido Doble Nickase (h) ERdj4: sc-410882-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)ERdj4 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa ERdj4 (h) y el plásmido de doble nickasa ERdj4 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a DNAJB9. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) ERdj4 | sc-410882-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) ERdj4 | sc-410882-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
El gen humano **DNAJB9** codifica **ERdj4**, una cocochaperona Hsp40/DnaJ luminal del retículo endoplásmico (RE) que se asocia con **BiP/HSPA5** para promover el plegamiento de proteínas y reforzar el control de calidad del RE. ERdj4 participa en la respuesta a proteínas desplegadas (UPR) y en la degradación asociada al RE (ERAD), apoyando la proteostasis al reconocer proteínas cliente mal plegadas y facilitar su procesamiento durante el estrés del RE. A través de estas vías, DNAJB9 contribuye a regular la maduración de proteínas secretoras y la adaptación celular al estrés proteotóxico, procesos implicados en trastornos caracterizados por agregación proteica aberrante y señalización crónica de la UPR. Se han descrito cambios en la expresión de DNAJB9/ERdj4 en contextos de estrés celular y se ha utilizado como lectura molecular en estudios que vinculan la proteostasis del RE con disfunción inflamatoria y metabólica.
ERdj4 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus DNAJB9 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de DNAJB9. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de DNAJB9. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con DNAJB9 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.