非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
Epac 抗体 (A-5): sc-28366. 对 HeLa 全细胞裂解液中 Epac 的表达进行 Western 印迹分析.
非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
Epac双切口酶质粒(h): sc-401807-NIC
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- Epac 双切口酶质粒（h）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- Epac双切酶质粒（h）和Epac双切酶质粒（h2）编码针对RAPGEF3的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：Epac: sc-28366，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
Epac双切口酶质粒(h) | sc-401807-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Epac双切口酶质粒(h2) | sc-401807-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
人类 **RAPGEF3** 基因编码 Epac（由 cAMP 直接激活的交换蛋白），这是一种鸟嘌呤核苷酸交换因子，优先激活 Rap1 和 Rap2，从而将 cAMP 信号耦联到依赖小 GTP 酶的细胞反应。Epac 可调控整合素介导的黏附、内皮屏障功能、囊泡运输以及细胞连接的重塑，将来自 GPCR 信号通路的输入整合到细胞骨架与膜动力学之中。通过 Rap 驱动对 MAPK 和 PI3K 相关信号节点的调控，RAPGEF3 影响多种细胞类型中的增殖、迁移与分泌。cAMP–Epac–Rap 信号通路的失调与心血管及代谢相关表型有关，并在炎症、纤维化以及癌相关的黏附与侵袭性变化等研究背景中受到关注。
Epac 双切酶质粒（h）由一对匹配的质粒组成，专为在 human 细胞系中对 RAPGEF3 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对RAPGEF3内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏RAPGEF3的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了RAPGEF3基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。