Endothelial Lipase Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406307
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- Endothelial Lipase El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico Endothelial Lipase, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: Endothelial Lipase Anticuerpo (4A9): sc-517036
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Endothelial Lipase Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-406307 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
LIPG codifica la lipasa endotelial (EL), una fosfolipasa A1 secretada y expresada por el endotelio vascular que hidroliza fosfolípidos en las HDL circulantes y modula la remodelación de las lipoproteínas y el transporte de colesterol. Al regular el catabolismo de las HDL y el recambio de fosfolípidos, la EL influye en la homeostasis lipídica vascular y se entrecruza con la señalización inflamatoria en células endoteliales y macrófagos. Las alteraciones en la actividad y la expresión de LIPG se han asociado con fenotipos relacionados con la dislipidemia y con procesos relevantes para la aterosclerosis, incluida la disfunción endotelial y la inflamación vascular impulsada por lípidos. LIPG también se estudia por su impacto en las redes extracelulares de lipasas junto con LPL y la lipasa hepática, y por sus efectos sobre la producción de mediadores lipídicos.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO Endothelial Lipase (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen LIPG en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del LIPG junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de LIPG tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína Endothelial Lipase.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en LIPG para la investigación de la señalización de Endothelial Lipase, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de LIPG críticos para la función de Endothelial Lipase
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de LIPG para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido Endothelial Lipase CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido Endothelial Lipase CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus LIPG. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR Endothelial Lipase (h) y el plásmido HDR Endothelial Lipase (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología LIPG para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana LIPG definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.