EMP-3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-407036
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- EMP-3 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico EMP-3, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:EMP-3 Anticorpo (SW-5): sc-81797
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
EMP-3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-407036 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
EMP3 codifica a proteína de membrana epitelial 3 (EMP-3), uma proteína de membrana do tipo tetraspanina implicada na regulação da adesão celular, da organização da membrana e da transdução de sinalização na superfície celular. Em células humanas, a EMP-3 tem sido associada à modulação de vias envolvidas na proliferação e nas respostas ao estresse, incluindo a sinalização associada a receptores e componentes a jusante das redes MAPK/PI3K, dependendo do contexto celular. Padrões alterados de expressão de EMP3 foram relatados em múltiplos tipos de tumores e em estudos relacionados a doenças neurológicas, sustentando seu uso como variável molecular em modelos de sinalização oncogênica, invasão e diferenciação. Como fator associado à membrana, a EMP-3 também é relevante para investigar alterações nas interações célula–célula e nas respostas ao microambiente.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO EMP-3 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene EMP3 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do EMP3, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do EMP3 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína EMP-3.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de EMP3 para a investigação da sinalização de EMP-3, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) EMP3 críticos para a função EMP-3
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos EMP3 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo EMP-3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo EMP-3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus EMP3. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo EMP-3 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR EMP-3 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia EMP3 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo EMP3 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.