Plásmido Doble Nickase (h) EMMPRIN/CD147: sc-400589-NIC

Basigina (BSG), también conocida como EMMPRIN/CD147, es una proteína transmembrana muy glicosilada de la superfamilia de las inmunoglobulinas que organiza las interacciones célula–célula y célula–matriz y modula múltiples redes de señalización. Es conocida principalmente por estimular la producción de metaloproteinasas de la matriz (MMP) y facilitar la remodelación de la matriz extracelular, con efectos posteriores sobre la invasión, las respuestas angiogénicas y la señalización inflamatoria. CD147 también actúa como chaperona de los transportadores de monocarboxilatos (p. ej., MCT1/MCT4), vinculando el transporte de lactato con la reprogramación metabólica y las vías adaptativas a la hipoxia. La expresión desregulada de BSG se asocia con la progresión tumoral, la fibrosis y las interacciones patógeno–célula huésped, lo que la convierte en un nodo central para estudios sobre la remodelación del microambiente y el acoplamiento metabólico.

EMMPRIN/CD147 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus BSG en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de BSG. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de BSG. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.

Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con BSG alterado.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.