Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plásmido Doble Nickase (h) emerin: sc-401048-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)emerin consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa emerin (h) y el plásmido de doble nickasa emerin (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a EMD. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: emerin Anticuerpo (H-12): sc-25284
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) emerin | sc-401048-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) emerin | sc-401048-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
EMD codifica emerin, una proteína de la membrana nuclear interna que se une a las láminas y a socios con dominio LEM para organizar la lámina nuclear y conectar la cromatina con la periferia nuclear. Emerin participa en el acoplamiento núcleo-citoesquelético a través del complejo LINC, regula la mecanotransducción e influye en programas transcripcionales implicados en la diferenciación muscular y el control del ciclo celular. La alteración de la arquitectura nuclear dependiente de emerin se asocia con cambios en la estabilidad del genoma, señalización aberrante y modificaciones en la mecánica celular. Las variantes en EMD se relacionan con la distrofia muscular de Emery–Dreifuss ligada al cromosoma X y con fenotipos de laminopatía afines, lo que lo convierte en un locus útil para estudiar la biología de la envoltura nuclear y la regulación génica en respuesta al estrés.
emerin El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus EMD en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de EMD. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de EMD. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con EMD alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.