Partículas Lentivirales de Activación (h) ELOVL6: sc-413125-LAC

ELOVL6 codifica una elongasa localizada en el retículo endoplásmico que cataliza etapas limitantes de la velocidad en la elongación de ácidos grasos saturados y monoinsaturados de cadena larga, incluida la conversión de especies C16 a C18. Al moldear la composición lipídica celular, ELOVL6 influye en la biofísica de las membranas, la homeostasis de las gotículas lipídicas y la señalización lipídica downstream vinculada al acoplamiento glucólisis–lipogénesis y al metabolismo de ácidos grasos. La actividad alterada de ELOVL6 se asocia con la remodelación metabólica observada en la resistencia a la insulina, la esteatosis hepática y la desregulación del manejo lipídico en tejido adiposo e hígado, y se ha estudiado en contextos en los que la disponibilidad de lípidos sostiene programas proliferativos e inflamatorios. Como resultado, ELOVL6 se investiga con frecuencia por su papel en la regulación, impulsada por lípidos, de las respuestas al estrés de orgánulos y de la comunicación cruzada entre vías metabólicas.

Las partículas de activación lentiviral ELOVL6 (h) responden a esta necesidad al empaquetar el sistema completo de activación transcripcional del mediador de activación sinérgica (SAM) en partículas lentivirales de alto título listas para la transducción, lo que permite una regulación al alza eficiente de ELOVL6 en una gama más amplia de tipos de células humanas.

Las partículas de activación lentiviral ELOVL6 (h) suministran todos los componentes funcionales del sistema mediador de activación sinérgica (SAM) a través de la transducción lentiviral. El sistema comprende tres preparaciones de partículas cotransducidas en las células diana: una que codifica dCas9 catalíticamente inactivo (mutaciones D10A y N863A) fusionado al dominio de transactivación VP64 con un gen de resistencia a la blasticidina; otra que codifica la proteína de fusión MS2-p65-HSF1 con un gen de resistencia a la higromicina; y otra que codifica un ARN guía (sgRNA) específico del objetivo de 20 nt fusionado a dos aptámeros de ARN MS2 con un gen de resistencia a la puromicina. Tras la transducción lentiviral y la integración genómica de los casetes de expresión, los componentes del SAM se expresan de forma estable y se ensamblan en el locus diana dentro de la región promotora proximal, aguas arriba del sitio de inicio de la transcripción ELOVL6, donde VP64, p65 y HSF1 actúan de forma cooperativa para reclutar la maquinaria transcripcional endógena e impulsar la regulación al alza sostenida de la expresión endógena de ELOVL6. El uso de dCas9 inactivo frente a nucleasas evita la introducción de roturas de ADN de doble cadena y preserva el locus genómico nativo ELOVL6 y la arquitectura reguladora.

El formato lentiviral ofrece varias ventajas prácticas: la integración genómica estable permite la activación hereditaria a lo largo de las divisiones celulares; las preparaciones de partículas de alto título eliminan la necesidad de producir el virus internamente; y la compatibilidad con tipos de células primarias, no divisibles y resistentes a la transfección amplía la accesibilidad experimental. La transducción exitosa puede confirmarse y enriquecerse mediante selección con triple antibiótico utilizando puromicina, higromicina y blasticidina.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.