ELL3 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-405835

Descripción general

ELL3 (gen 3 de leucemia rico en lisina once-diecinueve) codifica una proteína similar a un factor de elongación transcripcional, relacionada con la familia ELL, que interactúa con la ARN polimerasa II para influir en la elongación productiva y en la producción de transcritos. Aunque está menos caracterizado que otros parálogos de ELL, ELL3 se ha implicado en la regulación de programas de expresión génica vinculados a la identidad celular, la diferenciación y el calendario del desarrollo, mediante la modulación de la dinámica de la transcripción. El control alterado de la elongación y del procesamiento de ARN es una característica recurrente de la desregulación oncogénica y del desarrollo, lo que convierte a ELL3 en un objetivo relevante para estudiar cómo la maquinaria transcripcional contribuye a una expresión génica aberrante. En células humanas, investigar la función de ELL3 puede esclarecer el control transcripcional específico del contexto y sus posibles conexiones con firmas de expresión asociadas a enfermedad.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO ELL3 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen ELL3 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del ELL3 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de ELL3 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína ELL3.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en ELL3 para la investigación de la señalización de ELL3, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de ELL3 críticos para la función de ELL3
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de ELL3 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido ELL3 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido ELL3 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus ELL3. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR ELL3 (h) y el plásmido HDR ELL3 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología ELL3 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana ELL3 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.