Plásmido Doble Nickase (m) ELFN1: sc-433965-NIC
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (m)ELFN1 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa ELFN1 (m) y el plásmido de doble nickasa ELFN1 (m2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a Elfn1. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (m) ELFN1 | sc-433965-NIC | 20 µg | $410.00 |
Elfn1 codifica ELFN1, una proteína de adhesión postsináptica con repeticiones ricas en leucina y un dominio tipo III de fibronectina, que ayuda a organizar la conectividad sináptica en el sistema nervioso del ratón. ELFN1 participa en la señalización transináptica al unirse a socios presinápticos como los receptores metabotrópicos de glutamato, modulando la probabilidad de liberación de neurotransmisores y la plasticidad sináptica a corto plazo. A través de estas interacciones contribuye a la formación de circuitos y al equilibrio entre excitación e inhibición, procesos centrales para el desarrollo neuronal y la maduración sináptica. Las alteraciones de la señalización asociada a ELFN1 se han investigado en el contexto de la biología de enfermedades del neurodesarrollo y neuropsiquiátricas, en las que con frecuencia se ven perturbadas la especificación de sinapsis y la homeostasis de las redes neuronales.
ELFN1 El plásmido de doble nicasa (m) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus Elfn1 en líneas celulares mouse. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de Elfn1. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de Elfn1. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con Elfn1 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.