Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plásmido Doble Nickase (h) eIF4E2: sc-403245-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)eIF4E2 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa eIF4E2 (h) y el plásmido de doble nickasa eIF4E2 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a EIF4E2. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: eIF4E2 Anticuerpo (YB-18): sc-100731
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) eIF4E2 | sc-403245-NIC | 20 µg | $410.00 |
EIF4E2 codifica eIF4E2 (también conocida como 4EHP), un factor de iniciación de la traducción que se une al cap y modula el destino del ARNm al competir con eIF4E por el cap 5′ m7G y coordinar una represión traduccional selectiva. eIF4E2 actúa en la regulación génica posranscripcional mediante interacciones con complejos efectores de unión a ARN y de miRNA, influyendo en la estabilidad del ARNm y en el reclutamiento de ribosomas en vías que controlan el desarrollo, la diferenciación y las respuestas al estrés. También se ha relacionado con programas de traducción adaptativos a la hipoxia y con la proteostasis al moldear la síntesis de proteínas implicadas en la supervivencia celular y el metabolismo. El control desregulado de la traducción dependiente de cap que involucra redes asociadas a eIF4E2 es relevante para estudios de biología tumoral, neurobiología y adaptación celular al estrés, donde una selectividad traduccional alterada puede reconfigurar los resultados de expresión génica.
eIF4E2 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus EIF4E2 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de EIF4E2. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de EIF4E2. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con EIF4E2 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.