eIF4B Lentiviral Ativação Partículas de ativação de lentivirus (h): sc-402494-LAC
- alvos específicos: human
- 200 µl de alto titulo de partículas de ativação lentiviral CRISPR/dCas9 prontas para a transdução of transduction-ready
- eIF4B as Partículas de Ativação Lentiviral (h) agem como um sistema de ativação de transcrição sinergética ao mediador de ativação (SAM, que foi criado para regular positivamente com especificidade e eficiência a expressão genética via transdução celular com lentivirus
- eIF4B As partículas de ativação lentivirais (h) contem os seguintes elementos de ativação SAM:uma nuclease Cas9 (dCas9) desativada (D10A and N863A) ligadas a um domínio de transactivacao VP64, uma proteína de fusão MS2-p65-HSF1 e um alvo-especifico de RNA guia de 20 nt guia RNA. Ainda, as partículas contem genes de resistência a blasticidina, higromicina e puromicina
- Durante a transdução, o complexo SAM se liga a uma região especifica de aproximadamente 200-250 nt upstream da região de inicia da transcrição e assegura um recrutamento robusto de fatores de transcrição para uma eficiente ativação genética
- Os gRNAs codificados pelo eIF4B Plasmídeo de Ativação Lentiviral (h) e pelo eIF4B Plasmídeo de Ativação Lentiviral (h2) têm como alvo regiões reguladoras distintas do promotor EIF4B. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo: eIF4B Anticorpo (D-4): sc-376062
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
eIF4B Lentiviral Ativação Partículas de ativação de lentivirus (h) | sc-402494-LAC | 200 µl | $455.00 |
EIF4B codifica o fator humano de iniciação da tradução eIF4B, um regulador da tradução de mRNAs dependente de cap que promove o recrutamento do complexo de pré-iniciação 43S e aumenta a atividade de helicase de RNA no eixo eIF4F, facilitando o escaneamento através de 5′ UTRs estruturadas. Ao modular a eficiência de tradução, o eIF4B integra sinais de vias de crescimento e estresse, incluindo PI3K–AKT–mTOR e MAPK, para moldar a produção do proteoma durante a proliferação e a adaptação celular. A atividade desregulada do eIF4B tem sido associada a programas alterados de controle translacional implicados em sinalização oncogênica e fenótipos de sobrevivência, e é frequentemente estudado como um nó que conecta redes de quinases a montante à tradução seletiva de mRNAs. Essas características tornam o EIF4B um alvo útil para dissecar a regulação translacional, o acoplamento entre sinalização e tradução e a proteostase dependente de vias em células humanas.
As Partículas de Ativação Lentivirais eIF4B (h) respondem a esta necessidade ao encapsular o sistema completo de ativação transcricional do mediador de ativação sinérgica (SAM) em partículas lentivirais de alto título, prontas para transdução, permitindo uma regulação positiva eficiente de EIF4B numa gama mais ampla de tipos de células humanas.
As Partículas de Ativação Lentivirais eIF4B (h) fornecem todos os componentes funcionais do sistema mediador de ativação sinérgica (SAM) através da transdução lentiviral. O sistema compreende três preparações de partículas co-transduzidas em células-alvo: uma que codifica dCas9 cataliticamente inativo (mutações D10A e N863A) fundido ao domínio de transativação VP64 com um gene de resistência à blasticidina; uma que codifica a proteína de fusão MS2-p65-HSF1 com um gene de resistência à higromicina; e uma que codifica um sgRNA de 20 nt específico do alvo, fundido a dois aptâmeros de RNA MS2 com um gene de resistência à puromicina. Após a transdução lentiviral e a integração genómica das cassetes de expressão, os componentes do SAM são expressos de forma estável e reúnem-se no locus-alvo dentro da região promotora proximal a montante do local de início da transcrição EIF4B, onde VP64, p65 e HSF1 atuam cooperativamente para recrutar a maquinaria transcricional endógena e impulsionar a regulação positiva sustentada da expressão endógena de eIF4B. A utilização de dCas9 inativo em termos de nuclease evita a introdução de quebras de DNA de cadeia dupla e preserva o locus genómico nativo EIF4B e a arquitetura reguladora.
O formato lentiviral oferece várias vantagens práticas: a integração genómica estável suporta a ativação hereditária ao longo das divisões celulares; as preparações de partículas de alto título eliminam a necessidade de produção viral interna; e a compatibilidade com tipos de células primárias, não divisíveis e resistentes à transfecção amplia a acessibilidade experimental. A transdução bem-sucedida pode ser confirmada e enriquecida através de seleção tripla com antibióticos utilizando puromicina, higromicina e blasticidina.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.