Plásmido Doble Nickase (h) eIF2S3: sc-406266-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)eIF2S3 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa eIF2S3 (h) y el plásmido de doble nickasa eIF2S3 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a EIF2S3. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) eIF2S3 | sc-406266-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) eIF2S3 | sc-406266-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
EIF2S3 codifica la subunidad gamma del factor eucariota de iniciación de la traducción 2 (eIF2γ), un componente central del complejo ternario eIF2 que entrega el Met‑tRNAi iniciador a la subunidad ribosomal 40S durante la iniciación de la traducción dependiente de caperuza. eIF2S3 participa en el control de la síntesis proteica global y de programas de traducción selectiva vinculados a la respuesta integrada al estrés, en la que la fosforilación de eIF2α altera la dinámica de iniciación y reprograma la traducción de ARNm. A través de estas vías, EIF2S3 influye en la proteostasis, la progresión del ciclo celular y la adaptación al estrés en diversos tipos celulares. La alteración genética o la desregulación de EIF2S3 se asocia con fenotipos del neurodesarrollo y trastornos sindrómicos ligados al cromosoma X, lo que lo hace relevante para estudios mecanísticos del control translacional en modelos pertinentes para enfermedad.
eIF2S3 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus EIF2S3 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de EIF2S3. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de EIF2S3. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con EIF2S3 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.