EGFL6 Lentiviral Activation Particles (h): sc-411850-LAC

EGFL6 kodiert ein extrazellulärmatrixassoziiertes, sezerniertes Protein aus der EGF‑ähnlichen Familie, das zu Zell‑Matrix‑Interaktionen und zur Signalübertragung im Mikroumfeld beiträgt. EGFL6 wird mit der Regulation des Verhaltens von Endothel- und Epithelzellen in Verbindung gebracht, einschließlich Migration, Adhäsion und Überleben, was mit Funktionen bei Gewebeumbau und angiogeneseassoziierten Prozessen übereinstimmt. Über seine EGF‑ähnlichen Domänen kann EGFL6 Signalnetzwerke modulieren, die mit integrinvermittelten Signalwegen und wachstumsfaktorabhängigen Programmen verknüpft sind und die Zytoskelettdynamik beeinflussen. Eine dysregulierte EGFL6‑Expression wurde in mehreren Krankheitskontexten beschrieben, was seine Nutzung als molekulares Werkzeug zur Untersuchung von Gefäßremodelling, Tumormikroumfeld‑Biologie und Zellmotilitäts‑Phänotypen in humanen Modellsystemen stützt.

EGFL6 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente EGFL6-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

EGFL6 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der EGFL6-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen EGFL6-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen EGFL6-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.