EF-1 γ Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-405691-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- EF-1 γO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase EF-1 γ (h) e o Plasmídeo Double Nickase EF-1 γ (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para EEF1G. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:EF-1 γ Anticorpo (C-7): sc-393378
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
EF-1 γ Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-405691-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
EF-1 γ Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-405691-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
EEF1G codifica o fator de elongação da tradução eucariótica 1 gama (EF-1γ), um componente central do complexo eEF1 que entrega tRNAs aminoacilados ao ribossomo durante a tradução do mRNA. Além da síntese proteica, o EF-1γ contribui para a organização do citoesqueleto e para a proteostase, conectando o controle traducional a programas de crescimento celular e de adaptação ao estresse. Alterações na expressão ou na conectividade em redes de EEF1G foram observadas em estados celulares proliferativos e relacionados ao estresse, tornando-o relevante para estudar remodelações associadas à tradução na biologia de doenças. Como um nó altamente conectado em interactomas de RNA–proteína e de fatores de tradução, o EF-1γ é frequentemente utilizado como ponto de apoio para investigar o acoplamento entre síntese proteica, sinalização e transições de estado celular.
EF-1 γ O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus EEF1G em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de EEF1G. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função EEF1G. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com EEF1G interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.