EF-1 δ Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-405987-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- EF-1 δO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase EF-1 δ (h) e o Plasmídeo Double Nickase EF-1 δ (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para EEF1D. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:EF-1 δ Anticorpo (A-5): sc-393731
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
EF-1 δ Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-405987-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
EF-1 δ Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-405987-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
EEF1D codifica o fator de elongação 1-delta (EF-1δ), um componente do complexo eEF1 que dá suporte ao alongamento da tradução do mRNA ao promover a entrega de aminoacil-tRNAs ao sítio A do ribossomo e ao coordenar a troca de nucleotídeos no eEF1A. Além da síntese proteica básica, o EF-1δ contribui para o controle translacional ligado ao crescimento celular, à proteostase e à sinalização responsiva ao estresse, conectando a atividade ribossômica a redes regulatórias mais amplas. Alterações na expressão ou na função de EEF1D têm sido associadas a mudanças na homeostase da tradução e em programas de adaptação celular que são frequentemente remodelados em contextos proliferativos e neurodegenerativos. Como resultado, EEF1D é um ponto útil para estudar como a maquinaria de tradução se integra a vias que governam a progressão do ciclo celular e as respostas ao estresse.
EF-1 δ O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus EEF1D em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de EEF1D. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função EEF1D. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com EEF1D interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.