EDIL3 Lentiviral Activation Particles (h): sc-404813-LAC

EDIL3 (EGF-ähnliche Wiederholungen und discoidin‑I‑ähnliche Domänen 3), auch als Del‑1 bekannt, kodiert ein sezerniertes Glykoprotein der extrazellulären Matrix, das Zell‑Matrix‑Interaktionen und interzelluläre Signalübertragung moduliert. EDIL3 bindet an Integrine und beeinflusst die Adhäsion, Migration und angiogene Aussprossung von Endothelzellen, indem es extrazelluläre Signale mit der Umgestaltung des Zytoskeletts und dem Transport entzündlicher Zellen verknüpft. Über seine Effekte auf die vaskuläre Homöostase und die Rekrutierung von Leukozyten wird EDIL3 in Signalwegen untersucht, die mit Angiogenese, Gewebeumbau und Immunregulation zusammenhängen. Eine fehlregulierte EDIL3-Expression wurde mit der Biologie der Tumormikroumgebung, vaskulären Pathologien und entzündlichen Erkrankungen in Verbindung gebracht und ist daher für mechanistische Studien zur Wechselwirkung zwischen Endothel und Immunsystem relevant.

EDIL3 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente EDIL3-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

EDIL3 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der EDIL3-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen EDIL3-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen EDIL3-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.