Plásmido Doble Nickase (h) ECM29: sc-409848-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)ECM29 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa ECM29 (h) y el plásmido de doble nickasa ECM29 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a KIAA0368. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) ECM29 | sc-409848-NIC | 20 µg | $410.00 |
KIAA0368 codifica ECM29, una gran proteína de andamiaje que se asocia con el proteasoma 26S y ayuda a coordinar su ensamblaje, localización y control de calidad. Al modular la dinámica del proteasoma, ECM29 influye en el recambio proteico dependiente de ubiquitina y se intersecta con vías de proteostasis que regulan la progresión del ciclo celular, las respuestas al daño del ADN y la señalización por estrés. La alteración de la regulación del proteasoma se ha relacionado con una degradación desregulada de proteínas clave de señalización y con perturbaciones más amplias de la homeostasis celular, relevantes para la biología del cáncer y la investigación en neurodegeneración. En consecuencia, ECM29 se estudia con frecuencia en contextos donde la función del proteasoma, la ubiquitinación y la adaptación al estrés celular son variables experimentales centrales.
ECM29 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus KIAA0368 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de KIAA0368. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de KIAA0368. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con KIAA0368 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.