Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plasmide CRISPR/Cas9 KO EAP1 (h): sc-408947
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- EAP1 Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique EAP1, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: EAP1 Antibody (C-9): sc-514772
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO EAP1 (h) | sc-408947 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
IRF2BPL code pour EAP1, une protéine nucléaire à doigt RING impliquée dans le contrôle de la transcription et dans la régulation, dépendante de l’ubiquitine, de la stabilité des protéines. EAP1 a été associée à la modulation de programmes d’expression génique qui influencent la progression du cycle cellulaire, la différenciation et l’homéostasie neuronale, en accord avec des rôles dans la protéostase et la signalisation sensible au stress. La perturbation génétique d’IRF2BPL est associée à des phénotypes neurodéveloppementaux et neurodégénératifs, ce qui confirme sa pertinence dans des voies qui gouvernent le maintien neuronal et la fonction synaptique. En conséquence, IRF2BPL/EAP1 est étudiée pour ses rôles dans les mécanismes de régulation transcriptionnelle, le renouvellement des protéines lié à l’ubiquitination et la résilience cellulaire dans des systèmes modèles humains.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO EAP1 (h) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène IRF2BPL dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du IRF2BPL, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert IRF2BPL à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine EAP1.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en IRF2BPL pour l'étude de la signalisation de EAP1, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de IRF2BPL essentiels à la fonction de EAP1
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de IRF2BPL pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le EAP1 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h) et le EAP1 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h2) ciblent des sites distincts au sein du locus IRF2BPL. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le EAP1 plasmide HDR (h) et le EAP1 (h2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie IRF2BPL pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles IRF2BPL définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.