Plásmido Doble Nickase (h) Dynein IC2, cytosolic: sc-402079-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)Dynein IC2, cytosolic consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa Dynein IC2, cytosolic (h) y el plásmido de doble nickasa Dynein IC2, cytosolic (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a DYNC1I2. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) Dynein IC2, cytosolic | sc-402079-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) Dynein IC2, cytosolic | sc-402079-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
DYNC1I2 codifica la cadena intermedia 2 de la dineína citoplasmática 1 (Dineína IC2), una subunidad central del complejo motor de microtúbulos dirigido hacia el extremo menos, que acopla la dineína a la dinactina y a diversos adaptadores de carga. Este sistema motor sostiene el tráfico intracelular de endosomas, lisosomas y vesículas derivadas del Golgi, así como el posicionamiento del centrosoma, la organización del huso mitótico y el transporte retrógrado necesario para la homeostasis neuronal. La función de la Dineína IC2 se integra con las vías de transporte basado en microtúbulos, la progresión del ciclo celular y la dinámica de orgánulos que modelan la polaridad y la proteostasis. Las alteraciones de la maquinaria dineína–dinactina se han implicado en fenotipos del neurodesarrollo y neurodegenerativos y en otros trastornos vinculados a defectos del transporte axonal y de la fidelidad mitótica, lo que convierte a DYNC1I2 en un nodo útil para estudios mecanísticos.
Dynein IC2, cytosolic El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus DYNC1I2 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de DYNC1I2. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de DYNC1I2. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con DYNC1I2 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.