Dynein HC CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-400919

개요

DYNC1H1는 세포질 다이네인-1의 헤비 체인(heavy chain)을 암호화하며, ATP 가수분해 에너지를 미세소관을 따라 마이너스 말단 방향으로의 수송으로 전환하는 미세소관 기반 모터 단백질입니다. 다이네인 헤비 체인은 다이낙틴(dynactin)과 어댑터 단백질들과의 협동 작용을 통해 세포 내 물질 수송, 소기관 위치 조절, 엔도좀 및 라이소좀 역학, 축삭 수송, 그리고 유사분열 방추체의 조립과 방향성 확립에 핵심적으로 관여합니다. 미세소관 의존적 수송과 세포분열 과정을 조절함으로써 DYNC1H1는 신경세포의 유지, 극성, 그리고 단백질 항상성(proteostasis) 경로에도 영향을 미칩니다. 다이네인 헤비 체인의 유전적 교란 또는 기능 이상은 신경발달 및 신경근육 질환의 기전과 연관되어 있어, 수송 결함과 세포골격 스트레스 반응을 연구하는 데 중요한 표적입니다.

Dynein HC CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 DYNC1H1 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 DYNC1H1 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 DYNC1H1의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 Dynein HC 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 Dynein HC 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 DYNC1H1 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• Dynein HC 기능에 중요한 DYNC1H1 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 DYNC1H1 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• Dynein HC CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 Dynein HC CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 DYNC1H1 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  Dynein HC HDR 플라스미드 (h) 및 Dynein HC HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 DYNC1H1 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 DYNC1H1 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.