Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Dynactin 6 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406516
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- Dynactin 6 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico Dynactin 6, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: Dynactin 6 Anticuerpo (B-6): sc-398694
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Dynactin 6 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-406516 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
DCTN6 codifica la subunidad 6 de dinactina, un componente del complejo dinactina que coopera con la dineína citoplasmática para sostener el transporte basado en microtúbulos. La dinactina ayuda a vincular la dineína con diversos cargamentos y contribuye al tráfico intracelular, la motilidad de vesículas y la organización del citoesqueleto, lo que influye en el posicionamiento de los orgánulos y en los procesos mitóticos. A través de estas funciones, la dinactina 6 puede afectar vías que regulan la dinámica endosoma–lisosoma, la función del centrosoma y la fidelidad de la división celular. La alteración del transporte dependiente de dineína–dinactina se ha asociado con fenotipos neurológicos y proliferativos, lo que hace que DCTN6 sea relevante para estudios de la homeostasis celular y de mecanismos de enfermedad que implican defectos de tráfico.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO Dynactin 6 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen DCTN6 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del DCTN6 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de DCTN6 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína Dynactin 6.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en DCTN6 para la investigación de la señalización de Dynactin 6, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de DCTN6 críticos para la función de Dynactin 6
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de DCTN6 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido Dynactin 6 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido Dynactin 6 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus DCTN6. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR Dynactin 6 (h) y el plásmido HDR Dynactin 6 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología DCTN6 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana DCTN6 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.