Dvl-1/Dishevelled 1/DVL1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-400785

Descripción general

DVL1 codifica Dishevelled 1 (Dvl-1), una fosfoproteína citoplasmática que actúa como andamiaje central en la transducción de señales de Wnt. Dvl-1 integra entradas proximales al receptor procedentes de Frizzled y de correceptores para propagar tanto la señalización dependiente de β-catenina (canónica) como la de polaridad celular planar/Wnt–Ca²⁺ (no canónica), influyendo en la polaridad celular, la migración y los programas transcripcionales. A través de sus dominios DIX, PDZ y DEP, Dvl-1 coordina complejos multiproteicos que regulan la estabilización de β-catenina, la señalización de pequeñas GTPasas y la remodelación del citoesqueleto. La desregulación de la señalización Wnt/Dishevelled se vincula con frecuencia a alteraciones del patrón del desarrollo y a la activación de vías oncogénicas, lo que convierte a DVL1 en un nodo relevante para estudios mecanísticos de la reconfiguración de vías en contextos asociados a enfermedad.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO Dvl-1/Dishevelled 1/DVL1 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen DVL1 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del DVL1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de DVL1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína Dvl-1/Dishevelled 1/DVL1.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en DVL1 para la investigación de la señalización de Dvl-1/Dishevelled 1/DVL1, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de DVL1 críticos para la función de Dvl-1/Dishevelled 1/DVL1
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de DVL1 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido Dvl-1/Dishevelled 1/DVL1 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido Dvl-1/Dishevelled 1/DVL1 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus DVL1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR Dvl-1/Dishevelled 1/DVL1 (h) y el plásmido HDR Dvl-1/Dishevelled 1/DVL1 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología DVL1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana DVL1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.