Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
dUTPase Antibody (G-6): sc-166838. Western blot analysis of dUTPase expression in Jurkat (A) and HeLa (B) whole cell lysates.
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dUTPase CRISPR/Cas9 KO质粒 (h): sc-405843
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- dUTPase CRISPR/Cas9 基因敲除（KO）质粒（h） 是一组质粒混合物，每种质粒均编码 Cas9 核酸酶及针对特定靶点的 20 核苷酸引导 RNA（gRNA），其设计基于 GeCKO v2 文库中的序列，旨在实现最高的基因敲除效率
- gRNA序列引导Cas9在dUTPase基因组位点诱导位点特异性双链断裂（DSBs），从而通过非同源末端连接（NHEJ）实现基因敲除
- 嘌呤霉素抗性基因和 RFP 基因两侧有 LoxP 位点，因此在建立稳定的基因敲除细胞系后，可以通过 Cre 重组酶（Cre 向量：sc-418923）去除选择标记。
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：dUTPase: sc-166856，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
dUTPase CRISPR/Cas9 KO质粒 (h) | sc-405843 | 20 µg | $397.00 |
概述
DUT 编码人源 dUTPase（脱氧尿苷三磷酸酶），这是一种关键的核苷酸代谢酶，可将 dUTP 水解为 dUMP 和焦磷酸，从而维持细胞内较低的 dUTP 储量，并为胸苷酸生物合成提供底物。通过限制尿嘧啶掺入基因组 DNA，dUTPase 有助于维持复制保真性和基因组稳定性，并在功能上与碱基切除修复（BER）通路相衔接，该通路负责清除 DNA 中的尿嘧啶。DUT 活性改变可调控复制应激反应和 DNA 损伤信号传导，而这些过程在增殖性疾病以及遭受基因毒性应激的细胞中常常发生紊乱。作为嘧啶稳态的关键节点，DUT 常用于研究细胞周期进程、线粒体与细胞核 DNA 的维持，以及由核苷酸失衡驱动的诱变过程。
dUTPase CRISPR/Cas9 KO质粒（h）是一组旨在针对性地破坏human细胞系中DUT基因的质粒池。每条质粒均共表达一种独特的单引导RNA（sgRNA），该sgRNA针对DUT基因内的特定位点，并携带来自化脓性链球菌的Cas9核酸酶。这些质粒还编码GFP，可通过荧光显微镜或流式细胞术对成功转染的细胞进行荧光标记和富集。
多引导设计提高了在Cas9介导的双链断裂形成后，产生破坏DUT开放阅读框的插入或缺失（indels）的概率。CRISPR/Cas9系统引入的DNA断裂通过内源性非同源末端连接（NHEJ）途径修复，通常会导致移码突变，从而使dUTPase蛋白表达失活。
该CRISPR敲除系统能够高效构建DUT缺失的细胞模型，用于dUTPase信号传导研究、功能基因组学研究、癌症生物学研究以及人类细胞系中治疗反应的评估。
主要特点
- 针对对 dUTPase 功能至关重要的 DUT 外显子的 sgRNA
通过单质粒共表达 SpCas9 和 sgRNA 以简化递送过程
GFP 报告基因用于识别转染细胞
针对多个 DUT 基因组位点的质粒池以提高敲除效率
兼容转染递送
设计变体
CRISPRs +/- HDR
- 由 dUTPase CRISPR/Cas9 KO 质粒 (h) 和 dUTPase CRISPR/Cas9 KO 质粒 (h2) 编码的 gRNA 分别靶向 DUT 基因座内的不同位点。可能提供其中一种或两种靶向设计。具体供应情况请参见相关产品。
由 dUTPase HDR 质粒（h）编码的 HDR 供体构建体以及 dUTPase HDR质粒（h2）编码的HDR供体构建体包含一个嘌呤霉素抗性盒和一个RFP报告基因，其两侧由DUT同源臂包围，以支持在与CRISPR/Cas9敲除设计对应的特定DUT靶位点进行同源导向修复。HDR供体的供应情况可能有所不同。请查看“相关产品”了解供应情况。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。