Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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DUSP18 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-405897
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- DUSP18 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico DUSP18, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: DUSP18 Anticuerpo (E-2): sc-376923
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
DUSP18 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-405897 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
La fosfatasa de doble especificidad 18 (DUSP18) es un miembro de la familia de DUSP atípicas que desfosforila residuos de fosfoserina/fosfotreonina y de fosfotirosina para modular la señalización impulsada por quinasas. Se la ha vinculado con la regulación del tono de la vía MAPK y con procesos más amplios de respuesta celular al estrés que influyen en la proliferación, la supervivencia y la función mitocondrial. Al moldear redes de señalización dependientes de la fosforilación, DUSP18 puede afectar programas transcripcionales y la homeostasis metabólica de manera dependiente del contexto. La alteración de la actividad fosfatasa en esta clase de reguladores es relevante para enfermedades caracterizadas por una señalización desregulada, incluidos el cáncer y fenotipos inflamatorios o metabólicos, lo que convierte a DUSP18 en un nodo útil para la exploración de vías.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO DUSP18 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen DUSP18 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del DUSP18 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de DUSP18 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína DUSP18.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en DUSP18 para la investigación de la señalización de DUSP18, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de DUSP18 críticos para la función de DUSP18
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de DUSP18 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido DUSP18 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido DUSP18 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus DUSP18. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR DUSP18 (h) y el plásmido HDR DUSP18 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología DUSP18 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana DUSP18 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.