Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plasmide Double Nickase (h) DR4: sc-400747-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) DR4 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide DR4 Double Nickase (h) et le plasmide DR4 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant TNFRSF10A. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: DR4 Antibody (B-9): sc-8411
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) DR4 | sc-400747-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) DR4 | sc-400747-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
TNFRSF10A code le récepteur de mort 4 (DR4), un membre de la superfamille des récepteurs du TNF exprimé à la surface cellulaire, qui se lie à TRAIL et déclenche l’apoptose extrinsèque. Après la liaison du ligand, DR4 favorise l’assemblage du complexe de signalisation inducteur de mort et l’activation de la caspase‑8, avec un crosstalk en aval vers l’amplification mitochondriale et des réponses au stress associées à NF‑κB. La signalisation de DR4 s’intègre à des voies qui régulent les décisions de destinée cellulaire, notamment l’apoptose, la signalisation inflammatoire et la surveillance immunitaire. Une expression altérée ou une atténuation fonctionnelle de TNFRSF10A a été étudiée dans des contextes de biologie tumorale et de résistance à des signaux associés à l’apoptose, ainsi que dans une dérégulation plus large des réseaux de signalisation des récepteurs de mort.
DR4 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus TNFRSF10A dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de TNFRSF10A. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de TNFRSF10A. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de TNFRSF10A.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.