Plásmido Doble Nickase (m) DnaJC3: sc-437172-NIC
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (m)DnaJC3 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa DnaJC3 (m) y el plásmido de doble nickasa DnaJC3 (m2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a Dnajc3. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (m) DnaJC3 | sc-437172-NIC | 20 µg | $410.00 |
Dnajc3 codifica DnaJC3, una cochaperona asociada al retículo endoplásmico (también conocida como P58IPK) que ayuda a mantener la proteostasis durante la señalización de la respuesta a proteínas mal plegadas (UPR, por sus siglas en inglés). DnaJC3 modula vías sensibles al estrés al interactuar con chaperonas de la familia Hsp70 y al regular el eje PERK–eIF2α del estrés del RE, influyendo así en el control de la traducción y en la adaptación a condiciones proteotóxicas. A través de sus funciones en el control de calidad del RE y en la atenuación de la señalización de quinasas activadas por estrés, DnaJC3 es relevante para la investigación sobre la función de células secretoras, la inflamación y el estrés metabólico. La alteración en el manejo del estrés del RE vinculada a la actividad de DnaJC3 se explora con frecuencia en contextos como la homeostasis de las células β pancreáticas, el desequilibrio de la proteostasis asociado a la neurodegeneración y fenotipos más amplios de respuesta al estrés en modelos murinos.
DnaJC3 El plásmido de doble nicasa (m) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus Dnajc3 en líneas celulares mouse. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de Dnajc3. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de Dnajc3. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con Dnajc3 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.