DnaJB3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-420974
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- DnaJB3 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico DnaJB3, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
DnaJB3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-420974 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Dnajb3 codifica a DnaJB3, um membro da família de cocaperonas Hsp40/DnaJ que atua em parceria com a Hsp70 para regular o dobramento, o redobramento e a triagem de polipeptídeos mal dobrados. Por meio da estimulação da atividade ATPase da Hsp70 mediada pelo seu domínio J, a DnaJB3 contribui para a proteostase celular e sustenta vias responsivas ao estresse ligadas ao controle de qualidade de proteínas. Esses processos se cruzam com respostas ao estresse do retículo endoplasmático e com mecanismos de depuração proteolítica que influenciam a sobrevivência celular em condições de estresse proteotóxico. Alterações na função da rede de chaperonas são amplamente relevantes em modelos de disfunção metabólica e neurodegeneração, nos quais a proteostase comprometida e a sinalização de estresse contribuem para fenótipos associados a doenças.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO DnaJB3 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Dnajb3 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Dnajb3, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Dnajb3 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína DnaJB3.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Dnajb3 para a investigação da sinalização de DnaJB3, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Dnajb3 críticos para a função DnaJB3
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Dnajb3 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo DnaJB3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo DnaJB3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Dnajb3. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo DnaJB3 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR DnaJB3 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Dnajb3 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Dnajb3 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.