DNA-PK_CS 더블 틈내기효소 플라스미드 (h): sc-400337-NIC

PRKDC는 DNA 의존성 단백질 키나아제(DNA-PK)의 촉매 소단위인 DNA-PKCS를 암호화하며, 고전적 비상동 말단 연결(c-NHEJ) 경로를 통한 DNA 이중가닥 절단(DSB) 수선의 핵심 조절자입니다. Ku70/Ku80이 DNA 말단에 결합하면 DNA-PKCS가 모집되어 활성화되고, 말단의 시냅시스(말단 결합), 가공, 라이게이션을 조율합니다. 또한 림프구 발달 과정에서 V(D)J 재조합에도 기여합니다. DNA-PKCS 신호전달은 ATM/ATR 매개 DNA 손상 반응을 포함한 유전체 감시 네트워크와 상호연결되어 세포주기 체크포인트 조절과 염색질 역학에 영향을 미칩니다. PRKDC의 기능 또는 발현 이상은 유전체 안정성 저하, 방사선 민감성 표현형, 그리고 암에서의 DNA 수선 의존성과 연관되어 있어, 유전독성 스트레스와 저항성 기전 연구에서 널리 다뤄집니다.

DNA-PKCS 더블 니카제 플라스미드(h)는 human 세포주 내 PRKDC 유전자좌의 고특이성 편집을 위해 설계된 쌍을 이루는 플라스미드로 구성됩니다. 각 플라스미드는 Cas9 D10A 니카아제와 PRKDC 내의 반대 DNA 가닥을 표적으로 하는 고유한 sgRNA를 발현합니다. 반대 DNA 가닥의 인접 부위로 유도될 때, 두 니카아제는 서로 어긋난 단일 가닥 절단 부위를 생성하며, 이는 함께 엇갈린 이중 가닥 절단을 유발하여 두 가이드의 조화된 표적 활성을 필요로 합니다. 이렇게 생성된 DNA 절단은 내인성 세포 복구 경로, 특히 비동형 말단 결합(NHEJ)을 통해 해결되며, 이는 PRKDC의 기능을 방해하는 삽입 또는 결실을 초래한다. 표적 부위에서 이중 sgRNA 결합을 요구함으로써, 이중 니킹 접근법은 편집 특이성을 향상시키고 표적 정밀도에 대한 추가적인 제어가 필요한 응용을 위한 보완적인 CRISPR 전략을 제공한다.

편집된 세포를 효율적으로 식별할 수 있도록, 한 플라스미드는 형광 시각화를 위한 GFP를 발현하며, 다른 플라스미드는 항생제 선별을 위한 푸로마이신 내성 유전자를 포함하고 있습니다. 이러한 기능들은 공동 형질 도입된 세포 집단의 효율적인 농축을 지원하며, PRKDC 기능이 손상된 클론의 검증을 단순화합니다.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.